PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。能夠通過DNA基因追蹤系統(tǒng)來掌握患者體內(nèi)的病毒含量。它最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問題是容易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產(chǎn)生。那么PCR實驗室被污染的原因有哪些呢?
1、標(biāo)本間交叉污染
標(biāo)本污染主要有收集標(biāo)本的容器被污染,或標(biāo)本放置時,由于密封不嚴(yán)溢于容器外,或容器外粘有標(biāo)本而造成相互間交叉污染。標(biāo)本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導(dǎo)致標(biāo)本間污染。有些微生物標(biāo)本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散,導(dǎo)致彼此間的污染。
2、PCR試劑的污染
主要是由于在PCR試劑配制過程中,由于加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。
3、PCR擴增產(chǎn)物污染
這是PCR反應(yīng)中最主要最常見的污染問題,因為PCR產(chǎn)物拷貝量大(一般為1013拷貝/mL),遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測數(shù)個拷貝的極限,所以極微量的PCR產(chǎn)物污染,就可造成假陽性。
4、實驗室中克隆質(zhì)粒的污染
在分子生物學(xué)實驗室及某些用克隆質(zhì)粒做陽性對照的檢驗室,這個問題也比較常見。因為克隆質(zhì)粒在單位容積內(nèi)含量相當(dāng)高,另外在純化過程中需用較多的用具及試劑,而且在活細(xì)胞內(nèi)的質(zhì)粒,由于活細(xì)胞的生長繁殖的簡便性及具有很強的生命力,其污染可能性也很大。
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