PCR實(shí)驗(yàn)室分區(qū)的設(shè)置及要求都有哪些？
發(fā)布時(shí)間：2021-07-26 14:10
PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。它能夠通過(guò)DNA基因追蹤系統(tǒng)，對(duì)患者病情進(jìn)行科學(xué)、準(zhǔn)確、實(shí)時(shí)的掌控。那么PCR實(shí)驗(yàn)室分區(qū)的設(shè)置及要求都有哪些呢？
PCR實(shí)驗(yàn)室在平面布局中可以分成四個(gè)單獨(dú)工作區(qū)域：試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。這四個(gè)區(qū)域是被嚴(yán)格劃分開(kāi)的，有明顯的區(qū)域界線(xiàn)。為避免交叉污染，進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行，即只能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。各實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過(guò)傳遞窗進(jìn)行。
1、試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)：此區(qū)域的作用是貯存試劑的制備、試劑的分裝、主反應(yīng)混合液的制備。注意事項(xiàng)是實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目所使用的材料，如試劑與試劑原材料，標(biāo)本與標(biāo)本原材料等，這些都必須存放于本區(qū)內(nèi)。至于是否需要控制氣流壓力，本區(qū)倒是沒(méi)有嚴(yán)格要求。
2、標(biāo)本制備區(qū)：此區(qū)域的作用是臨床標(biāo)本的保存、核酸（RNA與DNA）的提取與貯存、核酸加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定RNA時(shí)DNA的合成。注意事項(xiàng)是為了防止鄰近區(qū)域的空氣進(jìn)入本區(qū)，壓力梯度對(duì)比鄰近區(qū)域要設(shè)置成正壓。進(jìn)行實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的操作時(shí)，工作人員要避免不必要的走動(dòng)，以防止加樣操作中發(fā)生氣溶膠污染。
3、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)：此區(qū)域的作用是DNA擴(kuò)增、把制備的實(shí)驗(yàn)試劑做成反應(yīng)混合液。注意事項(xiàng)是實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增的污染指數(shù)比較高，壓力梯度對(duì)比鄰近區(qū)域要設(shè)置成負(fù)壓，這樣做的好處是能有效防止氣溶膠從本區(qū)泄漏。
4、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：此區(qū)域的作用是測(cè)定相關(guān)擴(kuò)增片段。注意事項(xiàng)是實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)時(shí)如果已經(jīng)預(yù)設(shè)了全自動(dòng)封閉分析儀器，那么就沒(méi)有必要再劃分本區(qū)了。本區(qū)的壓力梯度對(duì)比鄰近區(qū)域要設(shè)置成負(fù)壓，這樣做的好處是能有效防止擴(kuò)增產(chǎn)物擴(kuò)散至其它區(qū)域。
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