PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。它能夠通過DNA基因追蹤系統(tǒng)來掌握患者體內(nèi)的病毒含量。它最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是容易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產(chǎn)生。那么河南PCR實驗室的防污染措施都有哪些呢？
1、PCR實驗室主要污染源
?。?）臨床樣本中存在的大量待測微生物。
（2）科研中得到的質(zhì)?？寺 ?/span>
?。?）以前分析研究的特定微生物。
?。?）大量存在于實驗環(huán)境中的特定微生物。
?。?）以前擴增產(chǎn)物的殘留污染。
這也是PCR實驗室最容易產(chǎn)生的將造成假陽性的污染。PCR擴增可以引起實驗室中擴增產(chǎn)物的積累，通常，一次典型的PCR擴增可以產(chǎn)生10^9拷貝的靶序列，如果氣溶膠化，甚至最小的氣溶膠都會含有10^6拷貝的擴增產(chǎn)物。如果不加以控制，在短期內(nèi)累積的氣溶膠化的擴增產(chǎn)物即會污染實驗室中的試劑、儀器設(shè)備和通風(fēng)系統(tǒng)，從而造成嚴(yán)重的實驗室污染，出現(xiàn)大量的假陽性結(jié)果。一些RNA擴增技術(shù)如基于核酸序列的擴增（NASBA）、轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴增 （TMA）和Qbeta復(fù)制酶等不易產(chǎn)生擴增產(chǎn)物的污染，這是由于它們的擴增產(chǎn)物為RNA，可以被環(huán)境中的RNA酶迅速地降解。
2、防污染措施
?。?）嚴(yán)格分區(qū)實驗室及嚴(yán)格遵守工作程序
基因擴增實驗室分為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本準(zhǔn)備區(qū)、PCR擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)等，必需備有各自必需的儀器設(shè)備、工作服、手套、加樣器和通風(fēng)系統(tǒng)。在每個區(qū)使用的試劑和廢物，必需直接在其各自的區(qū)域內(nèi)分裝或包裝。操作人員必需注意防止通過他們的頭發(fā)、眼睛和衣服將擴增產(chǎn)物從污染區(qū)攜帶至清潔區(qū)的可能性。
?。?）化學(xué)清污
實驗臺面可使用10%的次氯酸鈉（漂白劑）清洗，然后再用70%乙醇或清水洗去次氯酸鈉。次氯酸鈉具有氧化損傷核酸的作用，從而使可能留在實驗臺面 的擴增產(chǎn)物被破壞掉。要注意的是，次氯酸鈉不能區(qū)分提取的DNA和PCR擴增產(chǎn)物，用次氯酸鈉處理的樣本不能用于核酸擴增檢測。在實際工作中，有些物品比如放置擴增反應(yīng)管的盤必需從污染區(qū)轉(zhuǎn)回清潔區(qū)時，在轉(zhuǎn)回之前，應(yīng)將其置于2-10%的次氯酸鈉溶液中過夜，并充分沖洗。
?。?）擴增產(chǎn)物的修飾
臨床PCR檢測通常由3或4個步驟組成：核酸提取和擴增檢測試劑的配制。使用商品試劑盒時，試劑的配制量可大大減少；樣本的處理即靶核酸的提?。籔CR擴增；擴增產(chǎn)物的分析。使用實時熒光PCR方法，PCR擴增和擴增產(chǎn)物的分析同時完成。
如對以前擴增產(chǎn)物進(jìn)行適當(dāng)修飾，應(yīng)可以消除其污染后面新的擴增檢測，但為保證不影響靶核酸的擴增檢測，擴增產(chǎn)物修飾方法必需遵循兩個基本原則：一是擴增產(chǎn)物修飾后，應(yīng)可以與隨后擴增的靶序列區(qū)分，這就要求區(qū)別性修飾在打開擴增反應(yīng)管之前進(jìn)行；二是修飾不能干擾正常的擴增檢測。
擴增前修飾：UV照射、UNG酶處理。
擴增后修飾：補骨脂素、異補骨脂素、鹽酸羥胺、引物水解法。
以上就是河南PCR實驗室的一些防污染措施。更多實驗室相關(guān)產(chǎn)品信息，敬請關(guān)注河南中潤實驗工程公司官網(wǎng)，產(chǎn)品咨詢及實驗室EPC設(shè)計建設(shè)請聯(lián)系網(wǎng)站客服。
